Усули муайянкунии глюкозаи оксидиза

Принсипи усул. Усул ба хусусияти амали ферментҳои глюкозаи оксидаза асос ёфтааст. Ин фермент глюкозаро дар ҳузури оксигени молекулавӣ оксид мекунад ва глюконолактонро ташкил медиҳад, ки худ ба худ кислотаи глюкониро гидролизат мекунад. Глюкозаи оксидаза глюкозаро оксид карда, пероксиди гидрогенро ташкил медиҳад (H.)₂Оҳ₂), ки бо 4-аминоантипирин ва фенол таҳти таъсири пероксидаза реаксия мекунад. Дар натиҷа як пайвастаи ранги гулобӣ ба вуҷуд меояд, ки зичии оптикии он дар 510 нм ба консентратсияи глюкоза дар намуна мутаносиб аст.

глюкоза + О₂ + Ҳ₂Оҳ → кислотаи глюконӣ + H₂Оҳ₂

2 Н₂Оҳ₂ + 4-аминоантипирин + фенол → квинонимин + 4H₂Оҳ

Таҷҳизот CPK, центрифуга, термостат, рахҳо, қубурҳои озмоишӣ, пипетка, маводи биологӣ, реактивҳои дар маҳлули корӣ мавҷудбуда.

намунаҳои таҷрибавӣ, мл

намунаҳои стандартӣ, мл

озмоиши бекорӣ (N₂О), мл

Маҳсулоти калибровкавии глюкоза (истинод)

Лӯлаҳо дар термостат дар 37 ° С дар тӯли 15 дақиқа таҳқиқ карда мешаванд, пас дар CPC бо филтри сабз дар зарфҳо бо қабати ғафсии 5 мм бо намунаи холӣ андоза карда мешавад (N)₂О). Ранги гулобӣ пас аз инкубатсия 1 соат устувор аст.

Ҳисоб Таркиби глюкоза аз рӯи формула истеҳсол карда мешавад:

C =стандарти х C дар куҷо

C мазмуни глюкоза дар намунаҳои таҷрибавӣ аст, мол / л,

Эп - зичии оптикии интихоб,

Мехӯрад - зичии оптикии намунаи санҷишӣ,

Стандарти C - мундариҷа дар ҳалли калибровк, мол / л.

Қиматҳои муқаррарӣ:  тифлони навзод - 2,8-4,4 ммоль / л

Кўдакон - 3,9 -5,8 ммоль / л

 калонсолон - 3,9 - 6,2 ммоль / л

Гипогликемия (GHC).Афзоиши глюкозаи хун бо бисёр сабабҳо вобаста аст, ки аз рӯи он ду гурӯҳи гипергликемия ҷудо карда мешаванд.

1. Инсулятҳо - бо нокифоягии инсулин дар бадан ё аз сабаби ғайрисамарабахшии фаъолияти он.

2. Экстрасулярҳо (экстрасулярӣ) - ба таъсири инсулин вобаста нестанд.

Равандҳои зерин дар ташаккули HHCs аҳамияти назаррас доранд: зиёдшавии вайроншавии гликоген, зиёдшавии неоглюкогенез, ҷилавгирӣ аз синтези гликоген, коҳиш ёфтани истифодаи глюкоза бо таъсири антагонистҳои гормоналии инсулин: соматотропин, глюкортикоидҳо, тироксин, тиротропин.

Гипергликемияи алименталӣ ҳангоми истеъмоли аз ҳад зиёди глюкоза дар хун қайд карда мешавад (масалан, гипергликемия бо сарбории шакар). Гипергликемияи "Гепатикӣ" дар lesions диффузи ҷигар ба амал меояд.

Гипергликемияи доимӣ ва шадид аксар вақт диабети қандро ҳамроҳӣ мекунад. Ҷудо кардани диабети аз ҷониби инсулин вобаста ба инсулин ва диабет вобаста ба инсулин ва ё, мутаносибан, намуди I диабет ва диабети намуди II. Ташаккули диабети намуди I асосан бо синтези вайроншуда ва мубодилаи моддаҳои инсулин алоқаманд аст.

Гурӯҳи дуввуми гипергликемия асосан бо гиперфунксияи ғадудҳои эндокринӣ, ки гормонҳо истеҳсол мекунанд - антагонистҳои инсулин. Он дар бемориҳое ба монанди синдроми Иценко-Кушинг, акромегалия, тиротоксикоз, феохромоцитома, глюоганома мушоҳида мешавад. Сатҳи глюкозаи хун дар баъзе бемориҳои ҷигар баланд мешавад (аз ҷумла, дар 10-30% беморони сиррози ҷигар), гемохроматоз (сиррози пигментии ҷигар, диабети биринҷӣ).

Гипогликемия (GPG) - камшавии глюкозаи хун - аксар вақт бо зиёдшавии мутлақ ё нисбии сатҳи инсулин дар хун алоқаманд аст. Гипогликемияи экстрапанкреатикӣ дар натиҷаи номутавозунии байни шиддатнокии равандҳои гликогенолиз ва гликоногенез дар ҷигар дар гепатитҳои шадид ва музмини ҷигар, сиррози, дистрофияи ҷигар ва субакутии ҷигар, заҳролудшавӣ бо арсен, фосфор, заҳролудшавии пешопеши ҷигар қайд карда мешавад. . Пастравии консентратсияи хун аксар вақт дар беморони мубталои саратони илофа ва дигар омосҳои ашаддии локализатсия берун аз гадуд (фиброма, фибросаркома, нейрома), инчунин ҳангоми қайкунӣ бебаҳо, анорексия, диабети гепатит, уремия, лактацияи калон ва глюкозурияи занони ҳомила ба назар мерасад.

Аз сабаби осеби равонӣ, энцефалит, хунравии субарахноидӣ, варами мағзи сар мумкин аст гипогликемия бошад.

1. Ихтилоли меросии ҳазми карбогидратҳо.

2. Кадом намудҳои гиперглюкоземаро шумо медонед?

3. Сабабҳои гипергликоземияи патологӣ кадомҳоянд?

4. Сабаби гирифторшавии диабет, ки ба инсулин вобаста аст, дар чист?

5. Сабабҳои биохимиявии бемориҳои меросӣ кадомҳоянд: а) гликогеноз? б) агликогеноз? в) фруктоземия? г) галактоземия?

6. Тағйироти биохимиявӣ дар мубодилаи карбогидратҳо дар рӯза кадомҳоянд?

7. Принсипи усули муайян намудани таҳаммулпазирии глюкоза.

Усули оксидази глюкоза кай таъин карда мешавад?

Ин санҷиш барои муайян кардани таҳаммулпазирии шакар ва рушди prediabetes, инчунин дар баландии беморӣ истифода мешавад. Аммо барои чунин мақсадҳо таҳлил кам истифода мешавад, зеро ин арзиши баланд ва интизории тӯлонии натиҷаро дорад. Бештари вақт, муайян кардани глюкоза дар хун ва пешоб бо истифода аз ин усул дар ташхиси дифференциалии бемориҳо истифода мешавад:

Шакар фавран кам мешавад! Бо гузашти вақт, диабет метавонад ба як қатор бемориҳо, ба монанди мушкилоти биниш, ҳолати пӯст ва мӯй, захмҳо, гангрена ва ҳатто саратони саратон оварда расонад! Одамон таҷрибаи талхро барои мӯътадил кардани сатҳи шакарашон таълим додаанд. хонед.

• синдроми таҳаммулпазирии лактоза,
• таҳаммулпазирии фруктоза,
• секрецияи фруктоза бо моеъҳои бадан,
• баландшавии консентратсияи пентоз дар пешоб.

Бартарии бешубҳа озмоиши глюкозаи оксидаза дурустии он аст.

Асоси ин усул чист?

Роҳҳои гуногуни муайян кардани консентратсияи глюкоза дар хун мавҷуданд, аммо оксидаза глюкоза аз ҳама дуруст аст. Он ба он асос ёфтааст, ки ҳангоми пайвастани шакар бо оксиген атмосфера реагент оксид мешавад. Пероксиди гидроген ба маҳлул рехта мешавад. Ин модда бо ortotoluidine мутаассир шуда, як пайвастагии ранга ба вуҷуд меорад. Барои рафтори ин реаксия, мавҷудияти ферментҳои махсус заруранд. Ҳангоми реаксияи оксидиса, оксидази глюкоза ва ҳангоми ранг кардани моеъ пероксидаза мавҷуд аст. Зичии ранги маҳлул аз таркиби глюкоза вобаста аст ва аз мундариҷаи баланди он шадидтар хоҳад буд.

Моҳияти муайянкунии глюкозаи оксидаза глюкоза

Арзёбии натиҷа бо истифодаи усули миқдори фотометрия пас аз ҳамин давраи вақт гузаронида мешавад. Ҳатмии калибрченкунӣ, ки меъёри муайяни шакарро дар бар мегирад, ҳатмӣ мебошад ва аз ҳамин вақт шумо метавонед консентратсияи глюкозаро дар моеъҳои бадан, аксар вақт дар хун муайян кунед.

Таҳлил чӣ гуна гузаронида мешавад?

Мавод аз бемор дар меъдаи холӣ гирифта мешавад. Барои санҷиш хуни рагҳо ба миқдори 5 мл истифода мешавад. Дар арафаи ташхис ба бемор парҳези қатъӣ дода мешавад. Ин имкон медиҳад, ки дурустии натиҷаҳоро доварӣ кунад ва хатогиҳои эҳтимолии таҳлилро истисно кунад. 2 рӯз пеш аз гирифтани хун, бемор бояд одатҳои бади нӯшокиҳои спиртӣ ва тамокукаширо партояд. Ғайр аз он, истеъмоли хӯрокҳои аз ҳад ширинро маҳдуд кардан ва то ҳадди имкон аз ҳолатҳои стресс пешгирӣ кардан лозим аст.

Барои гирифтани плазма бо шакар, хун центрифуг карда мешавад.

Бештари вақт, ин усули муайян кардани консентратсияи глюкоза тавассути центрифутация гузаронида мешавад, ки унсурҳои шакл ҷудо карда мешаванд. Миқдори шакар дар плазма аллакай муайян карда шудааст. Вақте ки ба он ҳама реактивҳои зарурӣ илова карда мешаванд, ранг пас аз 20 дақиқа ба назар гирифта мешавад, агар санҷиш дар ҳарорати хонагӣ гузаронида шавад. Ҳисоб кардани глюкоза аз рӯи ҷадвали калибрченкунӣ ё бо истифодаи қоидаҳои поршен анҷом дода мешавад.

Реагентҳои тадқиқотӣ

Барои муайян кардани шакар, истифодаи усулҳои экспресс барои муайян кардани глюкоза дар хун мувофиқ аст. Ин ба осонии истифода ва натиҷаҳои зуд вобаста аст. Ғайр аз он, бемор ба лаборатория ё беморхона рафтан лозим нест. Аммо баръакси санҷиши глюкозаи оксидаза, чунин ташхис беэътимод аст. Азбаски он глюкозаро аз дигар қандҳо фарқ намекунад ва консентратсияи онҳоро муайян мекунад.

Асоси реаксияи глюкозаи оксидаза хлориди натрий 9% ва сулфати руҳ 50% мебошад. Онҳо дар марҳилаи центрифуатсия хун илова карда мешаванд. Ғайр аз он, ҳалли буферӣ бо кислотаи ангидрид ва ацетати натрий истифода мешавад. Усули титронӣ рН-и онро дар 4.8 муайян мекунад. Баъд аз он, оксидази глюкоза илова карда мешавад, ки дар натиҷа пероксиди гидроген ва пероксидаза бароварда мешаванд, ки дар ранг кардани маҳлул ба консентратсияи дилхоҳ барои ба даст овардани натиҷаи дақиқ иштирок мекунанд.

Меъёрҳои таҳлил

Андозагирии шакар дар бахшҳои махсус - миллимолҳо барои як литр маҳлул гузаронида мешавад.

Санҷиши хуни глюкозаи оксидазӣ дар меъдаи холӣ ҳатмист ва барои ин плазма ё хуноба истифода баред. Меъёри миқдори он барои калонсолон ҳам барои занон ва ҳам мардон 3,3-5,5 аст. Барои кӯдакони то 15 сола ин нишондиҳанда каме пасттар буда, аз 3.2-5.3 иборат аст. Дар кӯдакони навзод глюкозаи хун ба 1,7-4,2 баробар аст. Афзоиши нишондиҳандаҳо бо рушди беморони гирифтори диабет ё таҳаммулпазирии глюкозаи вайроншуда ба назар мерасад. Ин ҳолат пешгӯӣ аст ва агар сари вақт табобат карда нашавад, он ба зудӣ ба рушди ин патологияи шадид оварда мерасонад.

Оё то ҳол табобати диабет имконнопазир ба назар мерасад?

Аз рӯи он, ки шумо ҳоло ин сатрҳоро хонда истодаед, ғалаба дар мубориза бар зидди қанди баланди хун дар ҷониби шумо ҳоло нест.

Оё шумо аллакай дар бораи табобат дар беморхона фикр кардаед? Ин фаҳмо аст, зеро диабет як бемории хатарнок аст, ки агар табобат карда нашавад, метавонад ба марг оварда расонад. Ташнагии доимӣ, заҳролудии фаврӣ, чашми норавшан. Ҳамаи ин нишонаҳо ба шумо аввал шиносанд.

Аммо оё имкон дорад, ки натиҷаро ба ҷои натиҷа табобат кунанд? Мо тавсия медиҳем, ки хондани мақоларо дар бораи табобати ҷории диабет хонем. Мақоларо хонед >>